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豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷

豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷

產(chǎn)品型號:

所屬分類(lèi):動(dòng)物疾病類(lèi)ELISA快速檢測試劑盒

產(chǎn)品時(shí)間:2023-07-26

簡(jiǎn)要描述:豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷試劑盒本試劑盒主要目的是測定豬血清中豬藍耳病毒抗體,可用于評估感染豬的血清學(xué)診斷以及豬藍耳病毒疫苗免疫狀況分析。

詳細說(shuō)明:

EA02A00                     2016-01版

豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)說(shuō)明書(shū)

【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng)豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

英文名稱(chēng):Diagnostic Kit For Antibodies To

Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV Ab),ELISA

【規格】

96T×2/盒

【預期用途】

本試劑盒主要目的是測定豬血清中豬藍耳病毒抗體,可用于評估感染豬的血清學(xué)診斷以及豬藍耳病毒疫苗免疫狀況分析。

【檢驗原理】

本試劑盒應用固相酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理,由包被有高純度的豬藍耳病毒抗原的微孔反應板、辣根過(guò)氧化物酶標記的抗豬IgG及其它試劑配套組成。其反應機理為包被抗原與樣本中的PRRSV-Ab結合,再與酶標抗豬IgG抗體形成包被抗+PRRSV-Ab+酶標抗豬IgG抗體復合物,加入顯色劑,通過(guò)酶催化反應顯色。顯色深淺與PRRSV-Ab的量成正比,當樣本反應顯色后,經(jīng)酶標儀檢測所得結果超過(guò)設定的臨界值時(shí)結果判為陽(yáng)性,即表明免疫產(chǎn)生了抗體或有自然感染存在。

【主要組成成份】

1

PRRSV抗原包被板

96T×2

2

酶標記物

22ml

色帽

3

樣本稀釋液

50ml

透明

4

PRRSV-IgG陰性對照血清

1.5ml

綠色帽

5

PRRSV-IgG陽(yáng)性對照血清

1.5ml

紅色帽

6

顯色劑

12ml×2

色帽

7

終止液

12ml

色帽

8

20X濃縮洗滌液

50ml

白色帽

9

蓋板膜

2張

 

10

說(shuō)明書(shū)

1份

 

【自備器材】

1酶標儀,雙波長(cháng)450/630nm濾光片

2.微量移液器(單道1-100ul、0.5-10ul、多道30-300ul)

3.水浴箱或恒溫箱

4.微量振蕩器

5.一次性頭(10ul,200ul)

6.去離子水

【樣本要求】

1本試劑檢測的樣本為豬血清,樣本應無(wú)菌采集,2~8貯存應不超過(guò)一周,長(cháng)期應在-20以下保存。

2避免使用嚴重溶血、有沉淀物、含懸浮纖維蛋白及污染長(cháng)菌及含疊氮鈉血清樣本。

 

【實(shí)驗準備】

1試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實(shí)驗前,先取出置室溫30min,可以獲得jia結果。.

2樣本稀釋:用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作40倍稀釋?zhuān)♂尩臉颖净旌暇鶆蚰苋〉幂^好結果。

3配制洗滌液將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去離子水稀釋20倍(例:將50ml洗滌液加入950ml去離子水中)。若20倍濃縮洗滌液出現結晶,屬正?,F象,放置37℃至溶解后即可。

【檢驗方法】

1.加樣:根據樣本數量,取所需板條,檢測時(shí),設陰、陽(yáng)性對照各2孔,分別加入不用稀釋的陰、陽(yáng)性對照血清100μl于相應孔中(可不設空白對照)。其余為樣本孔,每孔加100μl用樣本稀釋液稀釋好的樣本(可做單孔也可雙孔檢驗)。

2.溫育:加樣后,蓋上蓋板膜,置37溫育30分鐘。

3.洗板:甩去孔內液體,用洗滌液注滿(mǎn)反應板孔,靜置10s左右,直接甩出,洗滌3次,后一次洗滌后干板內液體。

4.加酶:每孔加酶標記物100μl。

5.溫育:加好酶標記物蓋板膜,置37溫育30分鐘。

6.洗板:同步驟3。

7.顯色:每孔加顯色劑100μl,振蕩混勻,37避光反應10分鐘。

8.終止:每孔加終止液50μl,振蕩10秒,充分混勻,終止后即讀數。

9.讀數:以450nm/ 630nm雙波長(cháng)檢測,讀取各孔吸光度值(OD值)。

【結果判定】

在酶標儀上測各孔的OD值。檢測結果有效的條件是陽(yáng)性對照孔的平均OD值≥0.6,陰性對照孔的平均OD值必須<0.15;樣品中抗體存在與否,或樣本中抗體的相對水平的高低由S/P值決定,S/P值計算時(shí)按以下方式處理:

  S/P=(樣本OD450/630值-NCx(—))/(PCx(—)-NCx(—)),其中NCx(—)表示陰性對照孔平均OD450/630值,PCx(—)表示陽(yáng)性對照孔平均OD450/630值;

當樣本的S/P≥0. 2時(shí)判為陽(yáng)性;樣品S/P值<0.2時(shí)判為陰性;

若進(jìn)行大量樣本檢測時(shí),可使用試劑盒專(zhuān)業(yè)分析軟件進(jìn)行分析數據結果,該軟件可登陸本公司*網(wǎng)站下載。

【注意事項】

1.本試劑盒僅供研究使用。

2.不要使用過(guò)期的試劑盒組分,不要把不用批次的組分混合使用。

3.使用試劑盒之前,一定要仔細閱讀說(shuō)明書(shū)。

4.本試劑盒應按含有傳染性材料對待,試驗廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

5.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應在室溫中平衡至潮氣干盡后方可拆開(kāi),未用完的微孔板須放回有干燥劑的鋁箔袋并密封2℃-8℃保存。未用完的液體試劑應蓋好瓶蓋,與其它配套組份放入試劑盒中于2℃-8℃避光保存。

6.應用微量移液器加入樣本及試劑,并經(jīng)常校對其準確性。

7.加洗滌液時(shí)應做到滿(mǎn)而不溢,防止孔口有游離酶不能洗凈或各孔間的交叉污染。

8.終止液有腐蝕性,若濺到皮膚或衣物上應立即用大量清水沖洗干凈。

【儲存條件及有效期】

于2℃~8℃避光保存,防止冷凍,有效期12個(gè)月。

【生產(chǎn)日期及批號】

詳見(jiàn)包裝袋和外包裝盒。

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